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大小鼠脊髓模具的規(guī)范操作方法分享
大小鼠脊髓模具是一種專(zhuān)用于神經(jīng)科學(xué)研究中脊髓組織精準(zhǔn)定位、固定與切片制備的實(shí)驗(yàn)輔助工具，廣泛應(yīng)用于脊髓損傷、神經(jīng)退行性疾病及藥物干預(yù)等動(dòng)物模型研究。其通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化槽道設(shè)計(jì)，確保脊髓在灌注、取材、冰凍或石蠟包埋過(guò)程中保持解剖完整性與空間一致性，從而提升組織切片質(zhì)量與實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。掌握大小鼠脊髓模具科學(xué)、規(guī)范的操作方法，是實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的關(guān)鍵。
一、使用前準(zhǔn)備
清潔模具：使用前以75%乙醇擦拭或超聲清洗，去除殘留組織或固定液，避免交叉污染；
預(yù)冷處理：冰凍切片用模具需提前置于–20℃冰箱或干冰上預(yù)冷，防止組織融化；
匹配規(guī)格：根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類(lèi)選擇對(duì)應(yīng)模具——小鼠模具槽道長(zhǎng)約3–4cm，大鼠約4–5cm，直徑適配胸腰段脊髓（小鼠Φ1.5–2mm，大鼠Φ2.5–3mm）。
二、脊髓取材與置入規(guī)范
動(dòng)物經(jīng)心臟灌注生理鹽水及4%多聚甲醛后，迅速取出整段脊柱，置于冰冷PBS中；
在解剖顯微鏡下小心剝離椎骨，完整取出脊髓，避免牽拉或擠壓；
將新鮮或固定后的脊髓輕柔置入模具中央槽道，確保頭尾方向一致，無(wú)扭曲或折疊。
三、包埋與固定操作
冰凍切片：注入OCT包埋劑至沒(méi)過(guò)脊髓，傾斜緩慢排除氣泡，–80℃速凍；
石蠟切片：將模具連同脊髓轉(zhuǎn)入脫水梯度，再浸蠟包埋，確保組織與蠟充分融合；
包埋過(guò)程中可用細(xì)針輕壓脊髓，使其貼合槽底，防止漂浮偏移。
四、脫模與切片要點(diǎn)
冰凍塊從模具中輕敲脫出，若粘連可短暫回溫1–2秒；
切片時(shí)使脊髓橫斷面垂直于刀片，確保獲得標(biāo)準(zhǔn)橫切面；
對(duì)縱切實(shí)驗(yàn)，可選用帶縱向槽道的專(zhuān)用模具，或旋轉(zhuǎn)90°放置脊髓。
五、使用后維護(hù)
切勿用金屬器械刮擦模具內(nèi)壁，以免劃傷影響后續(xù)組織貼合；
OCT殘留可用溫水浸泡軟化后沖洗，石蠟殘留用二甲苯溶解；
干燥后存放于潔凈盒中，避免灰塵沉積。
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